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Brotherhood ist nicht Assassin's Creed 3, sondern eher Teil 2,5. Denn seine Geschichte knüpft direkt an das Ende von Assassin's Creed 2 an, auch der Held bleibt derselbe: Der Rennaissance-Assassine Ezio meuchelt und klettert diesmal in Rom. Einige spielerische Neuerungen haben sich die Entwickler allerdings ausgedacht. So gründet Ezio eine eigene Assassinen-Gilde und heuert Hilfs-Attentäter an - die allerdings völlig übermächtig sind. Außerdem gibt's erstmals einen Multiplayer-Modus, der sich - Überraschung! - ebenfalls ums heimliche Morden dreht.
Ezios erbitterter Kampf gegen den mächtigen Templer-Orden geht in die nächste Runde.
Diesmal führt es den legendären Meister-Assassinen nach Rom. Dort plant Ezio, das Übel an seiner Wurzel zu bekämpfen. Doch Gier und Korruption haben die Herrschaft über die gewaltige Metropole an sich gerissen. Um die korrupten Tyrannen der Hauptstadt zu besiegen, braucht Ezio mehr als nur Stärke. Auch seine Führungsqualitäten sind gefragt. Die gesamte Bruderschaft der Assassinen steht Ezio treu zur Seite und erwartet seine Befehle. Nur wenn die Assassinen wie ein Mann zusammenarbeiten, können sie ihre Todfeinde bezwingen.